金鹰国际娱乐APP,

服務熱線

+8610-84928167

HSC-NPG 小鼠

1. 基本信息


(1)模型簡介

辐照清髓的NPG小鼠移植来自人的脐带血、胎肝的造血干細胞(HSC)的模型。造血干細胞是所有造血和免疫細胞的共同祖細胞。HSC 移植 NPG 类高度免疫缺陷小鼠之后可以定植于小鼠骨髓,并不断产生各类造血、免疫細胞,如 T 細胞、B 細胞、NK 細胞、髓系細胞等。由于其免疫細胞是在小鼠体内“从头”发育出的,对小鼠宿主产生耐受,所以不出现 GvHD 现象,模型存活一年仍可以检测到人源細胞的稳定存在。这种模型的缺点是发育出的 T 細胞功能较弱。这是因为 T 細胞需要在胸腺中完成“education”过程,T 細胞受体形成 MHC 限制性。人源 T 細胞的前体在小鼠胸腺内完成发育,可能既表现小鼠 MHC 限制性,也表现 HLA 限制性,造成与人源細胞相互作用类似于异体(allo-)或异种(xeno-)排斥反应。另外,这种模型的另一个缺陷是髓系細胞发育不足,原因是某些调控发育的細胞因子在人鼠之间存在种属差异,鼠的因子对人的細胞无作用,造成模型中人源髓系細胞含量偏低。


(2)制作方法

高度免疫缺陷小鼠NPG经射线亚致死性辐照,破坏小鼠自体骨髓造血功能,再通过静脉注射、骨髓腔内注射或新生鼠肝内注射等途径移植人脐带血、骨髓、胎肝等来源的造血干細胞,12周以后采血检测人源各系血細胞的重建,确定血液中人/鼠細胞的嵌合比率(见图1)。

5dca1e6aa0b0a.png

图1  HSC-NPG小鼠制作流程示意图。


2.成功案例

金鹰国际娱乐APP已经完成几千例的NPG小鼠HSC-NPG小鼠模型制作和商业化稳定供应。移植人造血干細胞(HSCs)后,可以高水平重建造血系统。8周人CD45+細胞比例可以达到40%以上。早期主要是B細胞比例高;12周以及更长时间之后,人源造血細胞稳定重建,T細胞所占比例逐渐升高。


(1)人造血干細胞(HSCs)移植NPG小鼠可以高水平重建造血系统。

5dca1eb1dbb9b.png

图2  NPG小鼠移植人造血干細胞(HSCs)后,可以高水平重建造血系统。左图为将 5×104脐带血CD34+細胞通过骨髓移植入6-8周的NPG小鼠后检测结果; 右图为1×105脐带血CD34+細胞移植后16周在NPG小鼠脾脏中检测到高水平的人CD45+細胞。


(2)人造血干細胞(HSCs)移植NPG小鼠后重建各系造血細胞比例检测。

5dca1ee26c59a.png

图3人造血干細胞(HSCs)移植NPG小鼠后获得各系造血細胞分化的高水平重建。上图显示的为将5×104脐带血CD34+細胞移植16周后,在NPG小鼠外周血中检测到高水平的人CD45+細胞(46.54%)、CD19+ B細胞(70.9%)、CD3+ T細胞(17.33%)和CD33+髓系細胞(8%)。


 5dca1f2816e42.png5dca1f1f03f87.png


图4 人造血干細胞(HSCs)移植NPG小鼠后各系細胞重建。脐带血CD34+細胞移植NPG小鼠12周以及更长时间之后,人源造血細胞稳定重建,T細胞所占比例逐渐升高。



3.應用領域

-造血、免疫生物學研究

-血液病研究

-艾滋病等血液系統傳染病研究

-移植免疫研究

-腫瘤免疫研究,包括腫瘤微环境研究,免疫调节性抗腫瘤药物评价、激活T細胞的抗腫瘤双特异性抗体药效评价等

-基因治療研究