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擴繁

目前小鼠品系已达上万种,大鼠品系也超过上千种,这些品系的繁殖性能千差万别,需要根据具体品系的特点,针对性的优化种群管理方案。依托20年的大小鼠種群管理经验和完善的动物设施质控体系,金鹰国际娱乐APP可以根据客户需要,制定最优化的擴繁方案,提供品系建立、常规擴繁、快速擴繁和活體保種等专业服务。

 

1. 品系建立

大小鼠,按照育種方式不同,分爲近交系和封閉群。JAX將遺傳背景不清楚的;或者首建鼠(Founder)來源于3種或以上品系;或者首建鼠是遠交系(Outbred),統稱爲群(STOCK)。比如,STOCK按照全同胞兄妹交配20代之前,仍稱爲STOCK;兄妹交配20代之後,稱爲近交系(Inbred)。


術語

定義和說明

STOCK(群)

一個獨立的繁育群體。

Line(系)

譜系明確的一群動物,且來源于同一父母。

Inbred strain(近交系)*

至少連續20代兄妹交配培育而成的品系。所有動物都可追溯于同2只首建鼠。

Subline(亞系)

按照近交系标准独立于原近交系繁育的一群小鼠。如许多常见近交系的亚系(C57BL/6J,   C57BL/6N)。

Coisogenic(同類系)

有一個基因改變的近交系。如許多在近交系上進行基因修飾操作後獲得的品系。

Inbred substrain(近交亚系)*

按照近交系標准繁育20代的亞系,或者已經明確與近交系的遺傳區別(甚至是1個基因的區別)。

对于隨機轉基因和CRISPR技术产生的敲除鼠,由于插入位点/删除碱基数/拷贝数的不同,每一只founder(F0)的基因和表型可能不同。金鹰国际娱乐APP可以为客户提供标准的品系建立服务,筛选到符合实验需要的基因编辑模型(品系,见下图,源于JAX)。


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2. 快速擴繁

采用超数排卵的方法获得卵母細胞,通过新鲜或冷冻精子进行體外受精(IVF),将2-cell时期的受精卵胚胎移植到代孕小鼠体内,一代获得大量子代小鼠的过程。


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(1) 快速擴繁服务优点:

-只需要提供精子或少量雄性小鼠;

-6~12周即可提供大量同批次後代;

-基因敲除或CKO小鼠繁育周期縮短30~50%。


序號

仔鼠數量

快速擴繁时间

传统擴繁时间

1

30只後代

6周

24周

2

50只後代

6~8周

24周

3

100只後代

8~10周

32周

4

150只後代

8~12周

40周

5

200只後代

8~12周

46周

*數據源于B6背景小鼠


(2)科学经济擴繁方案制定:

按照计划擴繁,获得足够数量的大小鼠模型,是确保实验进行的前提。金鹰国际娱乐APP主要依据大小鼠的擴繁性能和行业推崇的擴繁性能计算公式,制定科学经济的擴繁方案。

(1)基本生理參數:

-小鼠6~8周左右性成熟,大鼠8~10周左右性成熟

-小鼠孕期約3周(19~21天);大鼠孕期約3.2周(22~25天)

-首胎間隔4~6周。

-小鼠傳一代需要3個月左右。

(2)影响擴繁速度的雌雄鼠因素:

①雄鼠,精子數量多,只要具有受精能力,一般不是限速因素;

②雌鼠,孕期3周,哺乳3~4周,窩間隔一般1.5~2個月,常常是限速因素。

(3)基因型杂合鼠的快速擴繁

使用基因阳性的雄鼠,与同背景的野生雌鼠卵(超排获得卵)作IVF快速擴繁,2个月左右即可获得100只以上的后代(根据实验需要,移植对应数量的受精卵2-cell期胚胎)。

(4)基因型纯合的快速擴繁

如果有大量的纯合基因阳性雌鼠,可以直接自然擴繁或作IVF擴繁。一般情况下没有纯合或杂合的基因阳性雌鼠,只能使用野生型雌鼠超排,作IVF获得F1杂合后代;然后到F2代才能获得纯合鼠。

(5)多基因快速擴繁

由于快速擴繁,依赖于订购大量的野生型同背景雌鼠获取卵进行IVF,即在1代时间内可以获得大量的杂合小鼠。对于多基因擴繁,情况会比较复杂多样,会根据客户需求(时间和成本),提供最优选的方案。


3.活體保種

若短时间内不用大小鼠模型,也可以小规模的活體保種。根据发育性能,基因型,繁育周期,进行科学的留种和换种计划,避免出现不育,以最小的笼位数维持种群。一般小鼠2~4笼;大鼠3~5笼进行活體保種。